操作污染总会在您的实验做的风生水起的时候,冷不防給你来点打击,我们总是在找各种各样的问题,操作污染不要亡羊补牢,需要从预防开始.
预防在细胞操作过程中带来的污染,对实验来说至关重要,从以下方面入手轻松和操作污染说拜拜!
一、实验环境清洁与消毒
每月2次对实验室进行全面清洁,包括地面、墙壁、实验台面等表面,使用75%乙醇、含氯消毒剂等消毒剂进行擦拭消毒。
每天进实验室前后进行一次空气消毒,可采用紫外线照射或空气消毒机进行消毒15-30min左右
进入实验室前,更换干净的实验服、鞋套、口罩、帽子,并尽量减少将外界环境中的微生物带入实验室,实验服和手套一定要连贯 ,实验服的袖口一定扎到手套里
二、超净工作台的使用与维护
在每次使用前,提前开启超净工作台的风机和紫外线灯,进行预消毒处理,消毒时间不少于30分钟。使用前后用75%乙醇擦拭工作台面和四周,进一步去除可能存在的微生物和污染物。
在超净工作台内进行实验操作时,保持良好的操作习惯,避免不必要的动作和干扰,维持工作台内的气流稳定和无菌环境。
定期对超净工作台进行检测和维护,包括风速、过滤器效率、紫外线灯强度等,确保其性能良好和无菌环境的稳定。
三、实验器材的清洗与消毒
实验器材使用前后应进行彻底的清洗和消毒处理,去除表面污垢、杂质和微生物。
玻璃器皿等耐高温器材可采用干热消毒法或湿热消毒法进行消毒,确保消毒温度和时间符合要求。
塑料器皿等不耐高温器材可采用适宜的消毒剂进行浸泡消毒,并注意避免使用刷子等硬物进行刷洗,以免刮伤表面。
四、操作过程中的无菌技术
在细胞操作过程中,严格遵守无菌操作规程,如点燃酒精灯后进行实验操作,试剂瓶经消毒酒精擦拭后,放入超净台备用 ,使用前后都用酒精灯将瓶口消毒一次,避免重复使用无菌的吸管、枪头等工具进行液体转移和吸取操作,避免交叉污染。
细胞培养所用到的试剂和耗材最好严格密封,并尽量在生物安全柜或超净工作台中进行拆封和使用。
培养箱除菌剂(启达生物:SD0053)
水浴锅除菌剂(启达生物 :SD0052)
五、其他注意事项
定期更换水浴锅中的水,并加入适量的杀菌剂来抑制细菌、真菌的滋长。
显微镜、恒温恒湿培养箱等设备应定期进行清洁和消毒处理,避免成为污染源。
在细胞培养过程中,注意观察细胞的生长状态和培养基的变化情况,及时发现并处理污染问题。
如发生污染情况,应首先判断污染源并采取相应的处理措施,将污染源所使用的试剂和耗材都进行24-48小时无菌培养,找到污染源,并进行消杀。