ClearVTM细胞周期与凋亡检测试剂盒
产品名称： ClearVTM细胞周期与凋亡检测试剂盒
英文名称： ClearVTM Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit
产品编号： C331408
产品价格： 298
产品产地： 美国
品牌商标： Arcegen
更新时间： 2025-05-07T15:27:47
使用范围： null
| 规格 | 价格 |
| 50T | 298.0 |
| 100T | 528.0 |
- 联系人 : 钟珍
- 地址 : 申江南路4388号1幢2层208室
- 邮编 : 201314
- 所在区域 : 上海
- 电话 : 139****6764 点击查看
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- 邮箱 : zhongz@magibagbio.com
- 二维码 : 点击查看
产品简介
本产品采用了经典的碘化丙啶染色（Propidium staining ，即 PI staining）方法对细胞周期与细胞凋亡进行分 析。碘化丙啶（Propidium，PI）是一种双链 DNA 荧光染料 ，其嵌入双链 DNA 后可以产生荧光 ，并且荧光 强度和双链 DNA 的含量成正比。
细胞内的 DNA 被 PI 染色后 ，可以用流式细胞仪对细胞进行 DNA 含量测定。假设 G0/G1 期细胞的荧光强 度为 1 ，那么含有双份基因组 DNA 的 G2/M 期细胞的荧光强度的理论值为 2 ，正在进行 DNA 复制的 S 期 细胞的荧光强度为 1-2 之间。凋亡细胞由于细胞核发生浓缩以及发生 DNA 片段化（DNA fragmentation）导 致部分基因组 DNA 片断在染色过程中丢失 ，因此凋亡细胞 PI 染色后呈现弱染 ，荧光强度小于 1 ，在流式 荧光图上出现 sub-G1 峰 ，即凋亡细胞峰。
细胞凋亡也可以用流式细胞仪观察细胞光散射的变化来检测。细胞发生凋亡时 ，由于胞浆和染色质浓缩、 核碎裂 ，产生凋亡小体 ，使细胞的光散射性质发生变化。凋亡前期 ，染色质皱缩 ，细胞密度增加 ，前向角 光散射色显著降低。凋亡后期 ，细胞产生凋亡小体 ，前向角光散射和侧向角光散色都显著降低。
本试剂盒通常应用于贴壁或悬浮细胞的细胞周期与细胞凋亡检测。如果用于组织的细胞周期与细胞凋亡检 测 ，则必须把组织消化成单细胞状态 ，才可以进行检测。
产品规格
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产品货号 |
C331408E |
C331408S |
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产品规格 |
50 T |
100T |
组分信息
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组分编号 |
组分名称 |
C331408E |
C331408S |
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C331408-A |
RNase A |
0.5 mL |
1 mL |
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C331408-B |
PI Solution |
0.5 mL |
1 mL |
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C331408-C |
Staining Solution |
25 mL |
25 mL*2 |
产品储存
冰袋（wet ice）运输。-20°C 避光保存 ，有效期为 2 年。
【注】 ：如果需要在短时间内多次重复使用 ，可以于 4℃避光保存 ，2 个月内有效。
操作注意
1. 本试剂盒需要使用流式细胞仪进行检测。
2. 细胞处理需轻柔 ，尽量避免人为的损伤细胞。
3. 为防止不同批次细胞在实验时所处周期不同导致重复性差 ，可以在实验前进行细胞的同步化处理。实验 细胞应处于对数生长期 ，贴壁细胞一般在 50～80%汇合度时收集为宜。
4. 400 目筛网过滤是用来将粘在一起的细胞团滤掉 ，留下单细胞 ，否则会出现人为的多倍体干扰。如果没 有条件过滤 ，请在染色之前将细胞轻弹以分散 ，再进行染色。
5. 荧光染料均存在淬灭问题 ，保存和使用过程中请尽量注意避光 ，以减缓荧光淬灭。
6. 操作碘化丙啶时 ，应注意防护 ，保护眼睛、避免吸入。
7. 为了您的安全和健康 ，请穿实验服并戴一次性手套操作。
8. 本产品仅作科研用途！
操作说明
1. 样品制备：
细胞数量控制在 1×105~ 1 × 106 个。
a）贴壁细胞：小心吸除细胞培养液，用胰酶消化细胞，制备成单细胞悬液。1000 g 离心 5 min，沉淀细胞， 弃上清 ，用 1 mL 预冷的 PBS 润洗细胞一次 ，离心收集细胞。
b）悬浮细胞： 1000 g 离心 5 min ，沉淀细胞 ，小心吸除上清。加入 1 mL 预冷的 PBS ，重悬细胞 ，再次离 心收集细胞。
c）组织细胞：将组织块用剪刀剪成尽量小的小块后 ，用 0.25%的胰酶消化 0.5-1 h ，经过 200-400 目筛网过 滤得到单细胞悬液。1000 g 离心 5 min，沉淀细胞。加入约 1 mL 预冷的 PBS ，重悬细胞 ，再次离心沉淀细 胞。如组织难以消化 ，可加入适量胶原酶。
2. 细胞固定
细胞沉淀用 1 mL 预冷的 70%乙醇轻轻混匀 ，4℃固定 2 h 以上或者过夜。接下来 1000 g ，离心 5 min 沉淀 细胞后 ，用 1 mL 预冷的 PBS 重悬。然后再次 1000 g 离心 5 min 沉淀细胞。
3. 染色
在 0.5 mL Staning Solution（C331408-C）中加入 10 μL PI Solution（C331408-B）和 10 μL RNase A（C331408-A） 溶液，混匀待用。每个细胞样品加入 0.5 mL 配置好的碘化丙啶染色液，轻轻混匀重悬细胞。37℃避光孵育 30 min，就可以进行流式检测 ，流式检测最好在 5 h 内完成。
【注】 ：配置好的 PI 染色液在短时间内可以 4℃保存 ，宜当日使用。
4. 流式检测和分析
细胞用 400 目筛网过滤 ，用流式细胞仪进行检测 ，在激发波长 488 nm 波长处检测 ，同时检测光散射情况。 采用适当分析软件进行细胞 DNA 含量分析和光散射分析。